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    ELISA試劑盒樣本內源性干擾因素介紹-睿創(chuàng )生物

    2024-06-03 [116]

    內源性干擾因素,包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等。

     


    一、類(lèi)風(fēng)濕因子在類(lèi)風(fēng)濕患者及正常人血清中,常含有較高或不同濃度的類(lèi)風(fēng)濕因子(RF),其一般為IgM型,亦有IgG和IgA型,具有與變性IgG產(chǎn)生非特異結合的特點(diǎn),因為在ELISA測定中,其可與固相上包被的特異抗體IgG以及隨后加入的酶標的特異抗體IgG結合,從而出現假陽(yáng)性結果。


    避免其發(fā)生的方法有:


    1.  用F(ab)2替代完整的IgG。


    2.  標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理。


    3.  檢測抗原時(shí),可用2-巰基yi醇加入到標本稀釋液中使RF降解。 


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    二、補體在固相酶免疫測定中,來(lái)自哺乳動(dòng)物的固相抗體和酶標二抗均有激活人補體系統的功能。一方面,固相抗體和酶標二抗可因其吸附及結合過(guò)程中抗體分子發(fā)生變構,使Fc段的補體C1q結合點(diǎn)暴露出來(lái),使C1q成為一個(gè)中介物將二者交聯(lián)起來(lái)出現假陽(yáng)性結果。另一方面,固相抗體也會(huì )因為活化補體的結合,封閉抗體和抗原的表位結合能力而引起假陰性。


    解決的辦法是:


    1.  用EDTA稀釋標本。


    2.  56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活。


    津公網(wǎng)安備 12010302002413號

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